无菌室应定期用适宜的液清洁，以保证无菌室的洁净度符合要求。 需要带入无菌室使用的仪器，器械，平皿等一切物品，均应包扎严密，并应经过适宜的方法。 工作人员进入无菌室前，必须用肥皂或液洗手，然后在缓冲间更换专用工作服，鞋，帽子，口罩和手套(或用75%的乙醇再次擦拭双手)，方可进入无菌室进行操作。
准备工作 1． 先进行无菌室空间的，开启紫外灯30—60分钟 2． 检验用的有关器材， 搬入无菌室前必须分别进会 3． 操作人员必须将手清洗，穿戴好无菌工作衣、帽和鞋，才能进入无菌室 4． 进入无菌室后再一次手部，然后才进行检验操作
无菌室前，应将所有物品置于操作之部位（待检物例外），然后打开紫外灯30分钟，时间一到，关闭紫外灯待用 进入无菌室前，必须于缓冲间更换过的工作服、工作帽及工作鞋。 操作应严格按照无菌操作规定进行，操作中少说话，不喧哗，以保持环境的无菌状态。 吸取菌液时，必须用吸耳球吸取，切勿直接用口接触吸管，如吸管碰到手及其它未的物体，必须重 新 更 换 ，以 防污染 。
定期检查室内空气无菌状况，数应控制在10个以下，发现不符合要求时，应立即彻底。/无菌室无菌程度的测定方法：取普通肉汤琼脂平板、改良马丁培养基平板各3个（平板直径均9厘米），置无菌室各工作位置上，开盖曝露半小时，然后倒置进行培养，测总数应置37℃温箱培养48小时；测霉菌数则应置27℃温箱培养5天。`霉菌总数均不得超过10个为 。